反相鍵合相色譜儀色譜柱的選擇要求包括選擇性合適、色譜峰形良好、重現性好和應用范圍寬等。
一、選擇性合適：
滿足不同的分離要求。
由于硅羥基的影響，許多情況下硅膠基質對整個鍵合相的性能起決定作用。內嵌極性基團鍵合相在使用高比例水溶液流動相時，色譜性能穩定。
二、色譜峰形良好：
滿足定量精度、靈敏度和分離度要求。
1、定量結果更準確、更精確：
（1）純度分析。
（2）穩定性分析。
2、靈敏度更高：
檢測下限更低，對低濃度雜質有更強的檢測能力。
3、分離度更好：
更有利于相鄰色譜峰的分離。
三、重現性好：
重現性是液相色譜分析的基本要求。
1、色譜柱間重現性：
指同一批次合成的填料之間的重現性。
（1）柱床填充質量控制：
1）理論塔板數。
2）色譜峰對稱。
3）柱反壓。
（2）無選擇性差異。
2、色譜柱批次間重現性：
指不同批次合成的填料之間的重現性。
（1）顆粒的物理性質。
（2）顆粒表面的化學性質。
四、應用范圍寬：
1、pH值范圍寬：
（1）pH＞8時，許多C18硅膠基質由于填料顆粒溶解，色譜柱內產生空隙，會過早地失去柱效。隨著鍵合相覆蓋率的增加，色譜柱壽命會延長。
（2）pH＜2時，許多C18硅膠基質由于鍵合相的水解作用，會過早地失去柱效。使用三官能團鍵合相可獲得最佳穩定性。
2、高溫穩定性。
